Concentrationi Operative (Primer Marcati, Sonde, Primer Reverse)

Aprendo i prodotti liofilizzati:

Centrifugare brevemente prima di aprire, il pellet potrebbe essersi depositato sul tappo.

Le HybProbes sono fornite secondo le seguenti quantità

300 pmol, 1 nmol, 3 nmol, 30 nmol.

Il prodotto liofilizzato non deve essere congelato, in quanto è stabile a temperatura ambiente. Occorre tenerlo al riparo dalla luce.

Impiego con il LightCycler®

Se non viene impiegata una coppia di sonde ma un primer marcato internamente con LC Red 640, la sonda fluoresceinata sarà localizzata sul filamento opposto. La concentrazione del primer marcato è quella usuale per qualsiasi primer:

Reazione asimmetrica (primer o sonda marcato internamente)

Concentrazione nella reazione

Quantità molari nella Master Mix

per reazione

Vol. per
reazione

32 campioni 640 µl

10 campioni 200 µl

1 campioni 20 µl

Volume di Soluzione Stock/Reazione

Primer iLC

0,50 µM

320 pmol

100 pmol

10 pmol

1 µl/10 µM

Probe 3FL

0,10 µM

64 pmol

20 pmol

2 pmol

1 µl/3 µM

2. Primer

0,20 µM

128 pmol

40 pmol

4 pmol

0,4 µl/10 µM