Concentrationi Operative (Primer Marcati, Sonde, Primer Reverse)
Aprendo i prodotti liofilizzati:
Centrifugare brevemente prima di aprire, il pellet potrebbe essersi
depositato sul tappo.
Le HybProbes sono fornite secondo le seguenti quantità
300 pmol, 1 nmol, 3 nmol, 30 nmol.
Il prodotto liofilizzato non deve essere congelato, in quanto è stabile a temperatura ambiente. Occorre tenerlo al riparo dalla luce.
Impiego con il LightCycler®
Se non viene impiegata una coppia di sonde ma un primer marcato internamente con LC Red 640, la sonda fluoresceinata sarà localizzata sul filamento opposto. La concentrazione del primer marcato è quella usuale per qualsiasi primer:
Reazione asimmetrica (primer o sonda marcato internamente) |
Concentrazione nella reazione |
Quantità molari nella Master Mix |
|
per reazione |
Vol. per |
|
|
32 campioni 640 µl |
10 campioni 200 µl |
1 campioni 20 µl |
Volume di Soluzione Stock/Reazione |
Primer iLC |
0,50 µM |
320 pmol |
100 pmol |
10 pmol |
1 µl/10 µM |
Probe 3FL |
0,10 µM |
64 pmol |
20 pmol |
2 pmol |
1 µl/3 µM |
2. Primer |
0,20 µM |
128 pmol |
40 pmol |
4 pmol |
0,4 µl/10 µM |