Concentrationi Operative (Primer Marcati, Sonde, Primer Reverse)

Aprendo i prodotti liofilizzati:

Centrifugare brevemente prima di aprire, il pellet potrebbe essersi depositato sul tappo.

Le HybProbes sono fornite secondo le seguenti quantità

300 pmol, 1 nmol, 3 nmol, 30 nmol.

Il prodotto liofilizzato non deve essere congelato, in quanto è stabile a temperatura ambiente. Occorre tenerlo al riparo dalla luce.

Impiego con il LightCycler®

Se non viene impiegata una coppia di sonde ma un primer marcato internamente con LC Red 640, la sonda fluoresceinata sarà localizzata sul filamento opposto. La concentrazione del primer marcato è quella usuale per qualsiasi primer:

Reazione asimmetrica (primer o sonda marcato internamente)	Concentrazione nella reazione	Quantità molari nella Master Mix		per reazione	Vol. per reazione
		32 campioni 640 µl	10 campioni 200 µl	1 campioni 20 µl	Volume di Soluzione Stock/Reazione
Primer iLC	0,50 µM	320 pmol	100 pmol	10 pmol	1 µl/10 µM
Probe 3FL	0,10 µM	64 pmol	20 pmol	2 pmol	1 µl/3 µM
2. Primer	0,20 µM	128 pmol	40 pmol	4 pmol	0,4 µl/10 µM