Biotin

Biotin bindet fast untrennbar an Streptavidin (Die Dissoziationskonstante liegt bei 10-12).

Für die 5'-Biotinylierung bevorzugen wir die Verwendung von Biotin-TEG, das einen längere und steifere Linkerstruktur mitbringt und über seine Struktur auch mehrfach eingebaut werden kann.

5'-Biotin kann mit vielen 3'-Modifikationen kombiniert werden. Die interne Biotinmarkierung kann verwendet werden, um viele Biotingruppen in ein Oligomer einzufügen. Wird das Oligomer als Sonde und nicht als Primer verwendet, ist eine Kombination mit einer 3'-Biotin Markierung kostengünstiger.

Biotinylierte Oligonukleotide können an mit Streptavidin beschichtete Oberflächen gebunden werden, zum Beispiel an Mikrotiterplatten oder magnetische Partikel.

Biotinylierte Produkte (PCR Produkte) lassen sich mit Streptavidin-Enzym Konjugaten nachweisen (Nichtradioaktive Detektion). Anwendungsbeispiele sind Nothern oder Southern Blots, In-situ Hybridisierung oder die Detektion von Mikroarrays.

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