Arbeitskonzentrationen
(Mark. Primer, Sonde, reverser Primer)
Lyophilisierte Produkte:
Vor dem Öffnen des Gefäßes kurz anzentrifugieren. Das Pellet könnte im
Deckel hängen.
Hybridisierungsproben für die LightCycler® Geräte
Der Versand der Hybridisierungsproben erfolgt lyophilisiert in festen Stoffmengen von 300 pmol, 1 nmol, 3 nmol, 6 nmol, 15 nmol, 30 nmol oder 100 nmol.
Lyophilisat nicht einfrieren. Vor Licht schützen und dunkel lagern.
Verwendung mit den LightCycler® Instrumenten
Interne Markierung: Intern markierter Primer, reverser Primer und
3'-markierte Sonde auf dem Gegenstrang.
Mit einem intern mit
LightCycler® Red markiertem Primer und einer
Fluorescein-Sonde wird ein Überschuß des markierten Primers eingesetzt,
damit die PCR asymmetrisch läuft und genügend Target für die
Hybridisierungssonde zur Verfügung steht:
Asymmetrisch (interne Markierung) |
Konzentration im Ansatz |
Stoffmenge für Mastermix |
|
je Reaktion |
Vol. je |
|
|
32 Ansätze 640 µl |
10 Ansätze 200 µl |
1 Ansätze 20 µl |
Vol. je Rkt./ Stammlösung |
Primer iLC |
0,50 µM |
320 pmol |
100pmol |
10 pmol |
1 µl/10 µM |
Probe 3FL |
0,10 µM |
64 pmol |
20 pmol |
2 pmol |
1 µl/3 µM |
2. Primer |
0,20 µM |
128 pmol |
40 pmol |
4 pmol |
0,4µl/10µM |