Arbeitskonzentrationen

(Mark. Primer, Sonde, reverser Primer)

Lyophilisierte Produkte:

Vor dem Öffnen des Gefäßes kurz anzentrifugieren. Das Pellet könnte im Deckel hängen.

Hybridisierungsproben für die LightCycler® Geräte

Der Versand der Hybridisierungsproben erfolgt lyophilisiert in festen Stoffmengen von 300 pmol, 1 nmol, 3 nmol oder 30 nmol.

Lyophilisat nicht einfrieren. Dunkel lagern.

Verwendung mit den LightCycler® Instrumenten

Interne Markierung: Intern markierter Primer, reverser Primer und 3'-markierte Sonde auf dem Gegenstrang.
Mit einem intern mit LightCycler® Red markiertem Primer und einer Fluorescein-Sonde wird ein Überschuß des markierten Primers eingesetzt, damit die PCR asymmetrisch läuft und genügend Target für die Hybridisierungssonde zur Verfügung steht:

Asymmetrisch (interne Markierung)	Konzentration im Ansatz	Stoffmenge für Mastermix		je Reaktion	Vol. je Reaktion
		32 Ansätze 640 µl	10 Ansätze 200 µl	1 Ansätze 20 µl	Vol. je Rkt./ Stammlösung
Primer iLC	0,50 µM	320 pmol	100pmol	10 pmol	1 µl/10 µM
Probe 3FL	0,10 µM	64 pmol	20 pmol	2 pmol	1 µl/3 µM
2. Primer	0,20 µM	128 pmol	40 pmol	4 pmol	0,4µl/10µM